كيفية تجنب سوء الفهم الشائع في استخدام نصائح الأنابيب المنخفضة؟

نصائح ماصة منخفضة الربط يمكن أن تقلل بشكل كبير من بقايا العينة بسبب تصميم السطح الداخلي للماء ، وهي مناسبة بشكل خاص للتعامل مع الكواشف باهظة الثمن أو السوائل اللزجة أو عينات التتبع (مثل البروتينات والأحماض النووية). ومع ذلك ، إذا لم يتم تشغيلها بشكل صحيح ، فقد لا تزال تؤثر على دقة التجربة وتكرارها. فيما يلي تحليل للأخطاء والحلول الشائعة التي تستخدم في تركيبة مع مواصفات التشغيل المختبرية:

سوء الفهم 1: تجاهل ما قبل الطرف

العملية الخاطئة: قم بتوحيد العينة مباشرة وحذف خطوة ما قبل الشحن.

التأثير: على الرغم من أن نصائح الأنابيب ذات الارتباط المنخفض يمكن أن تقلل من البقايا ، بالنسبة لعينات مثل المصل أو البروتين أو المذيبات العضوية ، إلا أن جدرانها الداخلية قد لا تزال تشكل فيلمًا سائلًا صغيرًا بسبب التوتر السطحي ، مما يؤدي إلى انخفاض حجم ماصة أولي.

النهج الصحيح: قبل الأنابيب الرسمية ، كرر تفريغ الطموح 2 إلى 3 مرات مع نفس العينة لتشكيل طبقة فيلم سائلة مستقرة على الجدار الداخلي للطرف (باستثناء السوائل ذات درجة الحرارة العالية/منخفضة درجة الحرارة).

سوء الفهم 2: سرعة الطموح سريعة جدًا أو تميل الزاوية

العملية الخاطئة: نضح السائل بسرعة أو يميل ماصة أكثر من 20 درجة.
تأثير:

ماصة سريعة جدًا: الفقاعات أو الشفط الخلفي (يندفع السائل إلى ماصة ويلوث المكبس) ؛
مائلة ماصة: يغير ضغط السطح السائل ، مما يؤدي إلى حجم ماصة غير دقيقة وزيادة حجم المتبقية. النهج الصحيح:
الأنابيب ببطء وتطلق ببطء: العمل بسرعة ثابتة والتحكم في سرعة إطلاق المكبس ؛
امسك عموديًا: حافظ على زاوية الميل ≤20 درجة عندما يتم غمر طرف ماصة في السطح السائل.
سوء الفهم 3: تجاهل الاختلافات التشغيلية للسوائل اللزجة
العملية الخاطئة: استخدم نفس سرعة الأنابيب مثل السوائل العادية للعينات عالية اللزوجة (مثل الجلسرين وتعليق الخلايا).
التأثير: تتدفق السوائل اللزجة ببطء على الجدار الداخلي لطرف الأنابيب ، وسيؤدي التفريغ السريع إلى زيادة كبيرة في الحجم المتبقي ، مما يعوض مزايا تصميم الامتزاز المنخفض.
النهج الصحيح:

تمديد وقت الانغماس: ابق في السطح السائل لمدة ثانية واحدة بعد الطموح قبل إزالته ، وتوقف لمدة ثانية واحدة قبل الضغط على الترس الثاني لتفجير السائل عند التفريغ ؛
اختر طرف ماصة واسعة الفم: بالنسبة للجزيئات الكبيرة أو عينات الخلايا ، استخدم طرف ماصة واسع النطاق للامتصاص (أكبر بنسبة 70 ٪ من الفتحة القياسية) لتقليل قوة القص.
الاعتقاد الخاطئ 4: ضرب بقوة عند تثبيت الحافة
العملية الخاطئة: يضرب مرارًا وتكرارًا مقبض ماصة "لتشديد" الحافة.
التأثير: سوف يرتدي التأثير طويل الأجل مكونات ختم ماصة ، وتدمير محكمة الإغلاق ، ويسبب خطأ في التسرب أو خطأ في الحجم.
الطريقة الصحيحة: أدخل ماصة رأسياً في الحافة ، واضغط على خفيفة ، ودوران قليلاً اليسار واليمين لتناسب.

المفهوم الخاطئ 5: تخزين أو إعادة استخدام غير صحيح
عملية خاطئة:

ضع ماصة ثابتة عندما يكون هناك سائل متبقي في الحافة ؛
إعادة استخدام النصائح المنخفضة للامتزاز يمكن التخلص منها لتوفير التكاليف. تأثير:
وضع مسطح يسبب التدفق الخلفي من السائل لتآكل ربيع المكبس.
قد تؤثر إعادة الاستخدام على الدقة بسبب التلوث المتقاطع أو التشوه الهيكلي. الطريقة الصحيحة:
تجاهل الحافة مباشرة بعد الأنابيب ، وقم بتعليق ماصة رأسيًا ؛
يُمنع إعادة الاستخدام بشكل صارم ، خاصةً عندما يتعلق الأمر بالتجارب الحساسة مثل PCR و Isotopes.
المشورة المهنية: تعظيم مزايا النصائح المنخفضة الاحتفاظ بها
تطابق خصائص السوائل:
السوائل المتطايرة (مثل الكلوروفورم): تجنب استخدام النصائح العادية للاحتفاظ بالمنخفضة واستخدام نصائح آمنة للمذيبات أو ماصات مكبس خارجية مصممة للكواشف المتطايرة.
التحقق من المعايرة:
تزن بانتظام وزن ماصة المياه النقية مع توازن تحليلي (1 مل = 0.9982 جرام عند 20 ℃) ​​للتحقق مما إذا كان الحجم الفعلي يفي بالمعيار.
ملخص النقاط الرئيسية: تحسن النصائح المنخفضة الاحتفاظ بالدقة عن طريق تقليل فقدان العينة ، ولكن إذا تم تجاهل تفاصيل العملية ، فقد لا تزال نتائج عكسية. التثبيت الموحد ، والتحكم في السرعة ، والتكيف مع خصائص العينة والاستخدام الصارم لمرة واحدة هي الأساس لتحقيق تجارب التكرار العالية .